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ICS 67.140.10 X 55 中华人民共和国国家标准 GB/T 23193—2017 代替GB/T23193—2008 茶叶中茶氨酸的测定 高效液相色谱法 Determination of theanine in teaUsing high performance liquid chromatography 2018-05-01实施 2017-11-01 发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 23193—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准代替GB/T23193—2008《茶叶中茶氨酸的测定 高效液相色谱法》。与GB/T23193- 2008相比,主要技术差异如下: 测定原理及前处理过程完全不一样; 样品处理差异:0.5g样品加水100mL,80℃水浴浸提45min,修改为1.0g样品加沸水 100mL,浸提30min; 一无净化及衍生步骤,过0.45um膜后,直接进样。 本标准由中华全国供销合作总社提出。 本标准由全国茶叶标准化技术委员会(SAC/TC339)归口。 本标准起草单位:中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院、国家茶叶质量监督检验中心、国家食品 质量安全监督检验中心、泉州出入境检验检疫局综合技术服务中心、福建日春实业有限公司。 本标准起草人:周卫龙、徐建峰、刘小力、陆小磊、石维妮、叶美君、刘相真、黄伙水、王启灿。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: GB/T23193—2008。 1 GB/T 23193—2017 茶叶中茶氨酸的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了用高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸含量的方法。 本标准适用于茶叶中茶氨酸的测定 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8302茶取样 GB/T 8303 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定 3原理 茶叶样品中茶氨酸经沸水加热提取、净化处理后,采用分离强极性化合物的RP-18柱,检测波长 210nm,用高效液相色谱仪进行测定,与标准系列比较定性、定量。 4试剂 4.1除非另有说明,在分析中所使用试剂均为分析纯,用水为GB/T6682规定的三级水。 4.2乙:色谱级。 4.3茶氨酸标准品(L-theanine):纯度≥99%。 4.4HPLC流动相 4.4.1流动相A:100%纯水。 4.4.2流动相B100%乙睛(4.2)。 4.5茶氨酸标准储备溶液 4.5.1茶氨酸标准储备溶液 称取0.05g茶氨酸(精确到0.0001g),用水溶解后移人50.mL容量瓶中,稀释至刻度,混勾,此溶 液每毫升含1mg茶氨酸。有效期为一年。 4.5.2茶氨酸标准使用液 zg分别准确吸取茶氨酸标准储备溶液(4.5.1)0.0mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、 2.0mL,用水定容至10mL得到浓度分别为0.0mg/mL、0.01mg/mL、0.02mg/mL0.05mg/mL、 0.10mg/mL、0.15mg/mL、0.20mg/mL的茶氨酸标准使用溶液。有效期为一年。 4.60.45μm水相滤膜。 5仪器 5.1高效液相色谱仪:包含梯度洗脱、紫外检测器及色谱工作站。 1 GB/T23193—2017 5.2 分析天平:感量0.0001g。 5.3 恒温水浴锅。 5.4 离心机:转速13000r/min。 6 测定步骤 6.1 样品处理 6.1.1 取样 按GB/T8302的规定。 6.1.2 试样制备 按GB/T8303的规定 6.1.3干物质含量测定 按GB/T8303的规定。 6.1.4样品制备 茶叶样品经磨碎混匀后,称取1.0g(准确至0.01g)磨碎试样(或茶叶)于200mL烧杯中,加沸蒸馏 水100mL。置于100℃的恒温水浴锅(5.3)中浸提30min,过滤,转移到100mL容量瓶中,冷却后,用 水定容至刻度,混匀。用0.45μm水相滤膜(4.6)过滤,或者取1mL样品,在13000r/min条件下高速 离心10min,然后进液相色谱分析。 6.2 测定 6.2.1 色谱条件 色谱条件如下: 色谱柱:RP-18 (粒径5 μm,250 mmX4.6 mm); 流速:0.5mL/min~1.0mL/min; 柱温:35℃±0.5℃; 进样量:10μL~20μL; 检测波长:210nm; 梯度洗脱条件:如表1所示。 表 1 梯度洗脱条件 时间/min A/% B/ % 备注 0 100 0 分析 10 100 0 分析 12 20 80 洗柱 20 20 80 洗柱 22 100 0 平衡 40 100 0 平衡 注:A:100%纯化水;B:100%乙腈 2
GB-T 23193-2017 茶叶中茶氨酸的测定 高效液相色谱法
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