ICS 65.020.20 CCS B 31 45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB45/T 2578—2022 天然富硒农产品硒含量鉴别与分类 Determination and classification of selenium content in natural selenium-rich agricultural products 2022 - 08 - 25 发布 广西壮族自治区市场监督管理局  发 布 2022 - 09 - 30 实施 DB45/T 2578—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出并宣贯。 本文件由广西壮族自治区农业农村厅归口。 本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院农业资源与环境研究所(广西富硒农业研究中心)、广 西壮族自治区土壤肥料工作站、广西标准化协会。 本文件主要起草人：刘永贤、潘丽萍、尹雪斌、谢罗松、何礼新、梁潘霞、邢颖、陈锦平、方顺、 廖青、江泽普。 I DB45/T 2578—2022 天然富硒农产品硒含量鉴别与分类 1 范围 本文件规定了天然富硒农产品的术语和定义、产地环境、硒含量要求和检测方法。 本文件适用于广西壮族自治区行政区域内种植、养殖在天然富硒区生产的富硒农产品的鉴别与分类。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 5009.93 食品安全国家标准 食品中硒的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 21191 原子荧光光谱仪 GH/T 1135 富硒农产品 NY/T 391 绿色食品 产地环境质量 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3 术语和定义 GH/T 1135界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 天然富硒农产品 natural selenium-rich agricultural products 通过生长在天然富硒区域而非任何方式的人为补充外源硒素，所获得的富含微量元素硒的产品，其 可食部分的总硒含量和有机硒含量符合本文件规定范围的初级农产品。 3.2 有机硒 organic selenium 通过生物转化与氨基酸结合而成，一般主要以硒代氨基酸的形式存在。 3.3 硒代氨基酸 seleno-amino acids 由硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸、硒甲基硒代半胱氨酸等组成的含硒氨基酸及其衍生物。 注：生物体中含硒的蛋白质为硒的主要存在形式，硒结合进入蛋白质可以有两种途径，一种是蛋白质合成时硒随机 取代了硫形成的硒代蛋氨酸，另一种是通过密码子UGA翻译形成硒代半胱氨酸。由这两种方式形成的含硒氨基 酸及其衍生物称为硒代氨基酸。 [来源：GH/T 1135—2017，3.3] 4 产地环境 应符合NY/T 391的要求。 1 DB45/T 2578—2022 5 硒含量要求 5.1 产地环境硒含量 5.1.1 土壤硒含量 天然富硒农产品产地环境（包括天然富硒农产品种植区或放养区及周边同类型土地）中土壤硒含量 应符合表1的要求。 表1 天然富硒农产品产地环境（天然富硒区）土壤硒含量分类要求 单位：mg/kg pH pH＜4.5 类型 水田 总硒含量 ≥0.50 4.5≤pH≤7.5 坡度≤5°的 坡度＞5°的 旱地与果园 旱地与果园 ≥0.55 ≥0.60 水田 ≥0.40 pH＞7.5 坡度≤5°的 坡度＞5°的 旱地与果园 旱地与果园 ≥0.45 ≥0.50 水田 ≥0.30 坡度≤5°的 坡度＞5°的 旱地与果园 旱地与果园 ≥0.35 ≥0.40 有效硒占总硒 含 量 质 量 分 ≤30 数％ 5.1.2 养殖区水源地水质总硒含量 天然富硒水产品养殖区水源地水质总硒含量不低于0.01 mg/L。 5.2 天然富硒农产品中总硒含量和有机硒含量要求 应符合表2的要求，符合有机硒占总硒含量质量分数或硒代氨基酸占总硒含量质量分数的指标即可。 表2 天然富硒农产品的总硒含量和有机硒（或硒代氨基酸）含量 指标 项目 谷物类 豆类 薯类（以干重计） 果类（鲜水果） 蔬菜类（以干重计） 食用菌类（以干重计） 肉类 蛋类 茶叶 中草药 油料类（花生及各类植物油） 水产类（鲜活水产品） 蜂产品（蜂蜜） 谷物类 总硒含量 mg/kg 有机硒占总硒含量 硒代氨基酸占总硒含量 质量分数％ 质量分数％ 0.10～0.50 0.10～1.00 0.10～1.00 0.01～0.20 0.01～1.00 0.15～5.00 0.15～0.50 0.15～0.50 0.25～4.00 0.15～3.00 0.05～0.50 0.10～0.50 0.01～0.20 0.10～0.50 ≥80 ≥80 ≥80 ≥80 ≥80 ≥80 ≥85 ≥90 ≥80 ≥80 ≥85 ≥85 ≥90 ≥80 ≥70 ≥70 ≥70 ≥70 ≥70 ≥70 ≥75 ≥80 ≥65 ≥65 ≥70 ≥75 ≥80 ≥70 注： 有机硒占总硒含量的质量分数、硒代氨基酸占总硒含量的质量分数指标只需符合其中任何一项即可。 2 DB45/T 2578—2022 6 检测方法 6.1 总硒含量 按GB 5009.93规定的方法测定。 6.2 土壤有效硒含量 按附录A规定的方法测定。 6.3 有机硒含量 按附录B规定的方法测定。 6.4 硒代氨基酸含量 按GH/T 1135规定的方法测定。 3 DB45/T 2578—2022 附 录 A （规范性） 土壤有效硒含量的测定方法 A.1 原理 土壤有效硒经磷酸二氢钾-磷酸氢二钾（KH2PO4-K2HPO4）缓冲溶液（pH7.0）浸提后，在酸性条件下 与硼氢化钾或硼氢化钠反应生成硒化氢（H2Se），由载气（氩气）带入原子化器中进行原子化，在硒空 心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光 强度与硒含量成正比。按外标法与标准系列溶液比较进行定量，按色谱保留时间进行定性。 A.2 试剂 除另有说明外，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T 6682中规定的一级水。 1) 磷酸二氢钾。 2) 磷酸氢二钾。 3) 氢氧化钾(或氢氧化钠)。 4) 盐酸（含量：36.0％～38.0％）。 5) 硼氢化钾(或硼氢化钠)。 A.3 试剂配制 A.3.1 1 mol/L KH2PO4-K2HPO4缓冲溶液（pH7.0） 称取6.80 g KH2PO4和11.40 g K2HPO4，溶于水并稀释定容至1 000 mL容量瓶中，摇匀，备用。 A.3.2 5％盐酸溶液(体积分数) 量取50 mL盐酸，溶于水并稀释定容至1 000 mL容量瓶中，摇匀，备用。 A.3.3 还原剂 称取1.0 g氢氧化钾（或氢氧化钠），用水溶解后再加入7.5 g硼氢化钾（或硼氢化钠），溶解，定 容至500 mL容量瓶中，摇匀，备用。 A.3.4 硒标准储备液 取1 000 mg/L硒标准液1.0 mL，5％盐酸溶液（A.3.2）定容至1 000 mL，此储备液浓度为1 mg/L。 A.4 仪器 主要有： 1) 原子荧光光度计，应符合 GB/T 21191 的规定，配备硒的元素灯； 2) 气浴振荡装置； 3) 分析天平，精度为 1 mg； 4) pH 计：精度为 0.01； 5) 实验室常用设备。 4 DB45/T 2578—2022 A.5 分析步骤 A.5.1 样品的制备 按照NY/T 1121.1要求，将采集后样品在实验室中风干、粉碎、过筛、保存。在样品采集、运输、 制备和保存过程中应避免沾污和待测元素损失。 A.5.2 试样浸提 称取1.000 xg（精确至0.001g）的风干过筛（0.15 mm）土壤样品于100 mL干燥塑料离心管中，加入 15 mL KH2PO4-K2HPO4缓冲溶液（A.3.1），置于25℃、200 rpm的恒温振荡器中提取90 min。然后再4000 rpm 下离心15 min，上清液用0.45 μm的滤纸过滤，于4℃下储存待测。 A.5.3 标准曲线的制作 用5％盐酸（A.3.2）逐级稀释标准储备液（A.3.4），最后配制成浓度为1 μg/L、2 μg/L、4 μg/L、 6 μg/L、10 μg/L的硒标准系列溶液（现配现用）。 A.5.4 空白试验 按照A.5.2相同的试剂和步骤进行空白试验。 A.5.5 测定 A.5.5.1 仪器参考条件 参数如下： 1) 负高压：270 V； 2) 灯电流：80 mA； 3) 原子化温度：800℃； 4) 炉高：8 mm； 5) 载气流速：300 mL/min； 6) 屏蔽气流速：800 mL/min； 7) 测量方式：标准曲线法； 8) 读数方式：峰面积； 9) 延迟时间：1 s； 10) 读数时间：15 s； 11) 加液时间：8 s； 12) 进样体积：0.5 mL。 A.5.5.2 进样测定 将制备好的试样导入原子荧光光度计中，按照与绘制校准曲线相同仪器工作条件进行测定。如果被 测硒元素浓度超过校准曲线浓度范围，应稀释后重新进行测定。同时，将制备好的空白试样导入原子荧 光分光光度计中，按照与绘制校准曲线相同仪器工作条件进行测定。 A.6 结果计算与表示 按公式A.1计算试样中硒的含量，以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结 果保留三位有效数字。 5 DB45/T 2578—2022 X= C-C0 ×V×1000··············································· (A.1) m×1000×1000 式中： X ——试样中硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； C ——试样浸提液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； C0 ——试样空白浸提液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； m ——试样质量，单位为克（g）； V ——试样浸提液总体积，单位为毫升（mL）。 A.7 结果的允许误差精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。 6 DB45/T 2578—2022 附 录