中华人民共和国国家标准 GB21926—2016 食品安全国家标准 含脂类辐照食品鉴定 2-十二烷基环丁酮的气相色谱- 质谱分析法 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB21926—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T21926—2008《辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮测定 气相色谱/质谱法》。 本标准与GB/T21926—2008相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 含脂类辐照食品鉴定 2-十二烷基环丁酮的气相色谱- 质谱分析法”; ———改进了硅胶柱层析法。GB21926—2016 1 食品安全国家标准 含脂类辐照食品鉴定 2-十二烷基环丁酮的气相色谱- 质谱分析法 1 范围 本标准规定了利用2-十二烷基环丁酮鉴定含脂辐照食品的气相色谱-质谱分析法。 本标准适用于脂肪含量大于1%的辐照食品的鉴定。 2 原理 采用正己烷将样品中的脂肪和2-十二烷基环丁酮一起萃取出来,经硅胶层析柱净化、浓缩后,用气 相色谱-质谱仪测定2-十二烷基环丁酮,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。 3.1 试剂 3.1.1 正己烷(C6H14)。 3.1.2 无水硫酸钠(Na2SO4):650℃灼烧4h,干燥器中冷却,保存备用。 3.1.3 乙醚(C4H10O)。 3.1.4 氮气(N2):纯度≥99.999%。 3.1.5 氦气(He):纯度≥99.999%。 3.2 材料 硅胶:250μm~500μm,柱层析用。使用前,将硅胶置于100℃烘箱活化12h,干燥器中冷却。于 具塞锥形瓶中加入4%(质量比)水去活化,摇动锥形瓶至硅胶分散均匀。将去活化的硅胶于干燥器中 平衡12h,一周内可用。 3.3 标准品 2-十二烷基环丁酮标准品(C16H30O):纯度≥99%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 2-十二烷基环丁酮标准储备溶液 准确称取适量2-十二烷基环丁酮标准品(精确至0.1mg),用正己烷溶解,配制成浓度为100μg/mL的 标准储备溶液,-20℃贮存,3个月内有效。GB21926—2016 2 3.4.2 2-十二烷基环丁酮标准工作溶液 用正己烷稀释标准储备溶液(100μg/mL),分别配制成0.10μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、1.00 μg/mL、2.50μg/mL、5.00μg/mL的各级标准工作溶液,-20℃贮存,1个月内有效,但出现谱峰异常时 应考虑重新配制。 4 仪器和设备 4.1 气质联用仪:配备弱极性(如DB-5)或适当性质和规格的毛细管柱,柱长:30m,内径:0.25mm,膜 厚:0.25μm。 4.2 索氏提取器。 4.3 氮吹仪。 4.4 电动搅拌机。 4.5 恒温干燥箱。 4.6 恒温水浴锅。 4.7 旋转蒸发仪。 4.8 电子天平:感量0.1mg。 4.9 玻璃层析柱:柱长:200mm~300mm,内径:20mm。 5 分析步骤 5.1 试样制备 选取样品中带脂肪的部位,牛肉、猪肉等固体样品切成小块,鸡蛋等液态样品应干燥至半固体状。 用电动搅拌机绞碎并混匀,置于密闭玻璃管中或金属箔内。 5.2 脂肪提取 称取20g无水硫酸钠和20g样品(可根据样品脂肪含量适当调整)放入纤维材质抽提套管中,混合 后用脱脂棉塞住管口。向索氏提取器中加入100mL正己烷,将抽提套管放入提取器中,再加入40mL 正己烷,以约1h虹吸4次的速度,加热回流萃取6h。 收集全部脂肪提取液,旋转蒸发浓缩至2mL~3mL(45℃水浴,约25kPa)。将浓缩后的脂肪转 移至具塞玻璃管中,氮吹浓缩至恒重。 5.3 硅胶柱层析 在玻璃层析柱中填充30g去活化的硅胶,硅胶顶部盖上1cm厚的无水硫酸钠,用2倍柱体积的正 己烷预淋洗。称取5.2中制备的1.0g脂肪,溶于5mL正己烷,上柱。先用150mL正己烷淋洗,流速 控制在2mL/min,弃去淋洗液。再用480mL含有1%乙醚的正己烷溶液洗脱,弃去先流出的230mL洗 脱液,收集剩下的洗脱液。于40℃水浴将洗脱液旋转蒸发浓缩至2mL~5mL,浓缩液转移至 10mL试管中,用2mL~5mL正己烷洗涤旋转蒸发瓶两次,洗涤液合并至试管中。于40℃氮气吹至 近干。用正己烷定容至0.5mL,转入进样瓶待测。 5.4 仪器参考条件 a) 色谱柱升温程序:120℃保持1min,然后以15℃/min升温至160℃;再以0.5℃/min至 175℃;再以30℃/min至290℃,保持10min,检测器温度250℃;